Forest background
バイオインフォの森へようこそ
制限酵素

制限酵素

目次

制限酵素の分類とその特徴

制限酵素は、I型、II型、III型の3つの型に分類されます。

I型制限酵素

I型制限酵素は、認識部位と切断部位が異なるという特徴があります。認識部位から1000塩基対以上離れた部位を切断します。

II型制限酵素

II型制限酵素は、I型とは異なり、認識部位と切断部位が一致するという特徴を持っています。

この特性により、II型制限酵素は遺伝子組み換えの実験や遺伝子クローニングに頻繁に用いられます。

代表的なII型制限酵素に、EcoRIがあります。EcoRIは、認識部位であるGAATTCを切断し、5'末端には突出した一本鎖(付着末端)を作り出します。

III型制限酵素

III型制限酵素は、認識部位と切断部位が離れている点でI型に似ていますが、認識部位から25-27塩基対離れた部位を切断します。

制限酵素の実験手順、解析手順、手続き

制限酵素を用いた実験の一般的な手順は以下の通りです。

    1. 制限酵素に適したバッファと制限酵素の混合液を作製する。
    1. 適量のDNA断片を加える。
    1. 37℃で一定時間(多くの制限酵素は1時間)インキュベーションさせ、反応を進行させる。
    1. 断片化されたDNAのサイズを解析するためにアガロースゲル電気泳動を実施する。

制限酵素の応用

制限酵素の応用例としては、遺伝子クローニングやDNAフィンガープリント、遺伝子マッピングなどがあります。

また、生物学的研究で使用されるゲノム編集技術の一部、特にCRISPR/Cas9システムのCas9は制限酵素の1種です。

参考書籍

バイオ実験基本セット

バイオ実験イラストレイテッド

生命科学基礎セット